A、浸出液的制备
取5g固体曲，加入蒸馏水90ml，pH4.6乙酸钠缓冲液10ml，摇匀，40℃保温1小时。用脱脂棉过滤为5%固体曲浸出液。
B、吸取2%可溶性淀粉溶液25ml，置于50ml容量瓶中，于40℃水浴中预热5min，准确加入5ml酶液，摇匀，记录时间，40℃水浴糖化1h。
C、加入0.1mol/L NaOH 15ml 终止酶解反应，冷却至室温，用水定容至刻度。
D、空白液：吸取2%可溶性淀粉25ml，置于50ml容量瓶中，先加入0.1mol/LnaOH 15ml，然后准确加入5ml 酶液。40℃水浴保稳1h，然后定容至刻度。
E、葡萄糖测定
吸取费林试剂甲，乙各5ml，置于150ml三角瓶加空白液5ml，并用滴定管预先加入适量的0.1%标准葡萄糖溶液使滴定时消耗0.1%标准葡萄糖溶液在1ml 之内，加热至沸腾。立即用0.1%标准葡萄糖溶液滴定至蓝色消失。
F糖化液测定
用酶液糖化代替5ml空白液
（2）计算
每消耗1ml标准葡萄糖溶液，相当于1个酶活力单位。
每克干曲中含糖化酶活力单位=（A-B）*N/W
其中 A为空白消耗毫升数   B为样品消耗毫升数   N为稀释倍数   W为水分含量
及pH，对蛋白酶活力影响因素大小一次为温度，pH，初始水分含量及原料配比。由此可知，对三种酶活力影响最大的因素是温度，并且31℃优于28℃及34℃，这反映出温度是糖化酶及酸、中性蛋白酶合成的重要条件，选取适当的温度可以提高三种酶活力。
pH是影响蛋白酶活力的第二大因素，pH为3～5时有利于酸性蛋白酶的合成，而pH为5～7是则有利于菌体合成中性蛋白酶，综合两者，pH确定为5，能得到较高的两种蛋白酶活力，并且此条件下糖化酶活力为最高。


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