
响应面法优化两相体系发酵生产天然香料β-苯乙醇
作品编号:SWHX0228 开发环境: WORD全文:30页 论文字数:12000字 此响应面法优化两相体系发酵生产天然香料β-苯乙醇毕业设计完整版包含[论文] |
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选择合适的有机溶剂是两相体系中生物转化成功进行的关键因素之一。对生物催化剂的生物相容性和对底物和产物合适的分配是选择有机溶剂的2个主要指标。其中有机溶剂的生物相容性可以用其在标准水/正辛醇体系中的分配系数的对数值 logP 值衡量。logP<4 的有机溶剂对马克斯克鲁维酵母细胞有毒性,logP 在4~6 之间的有机溶剂不确定,而logP>6 的有机溶剂则无毒性[12]。所以本实验选取不同 logP 值的几种有机溶剂进行比较。初始装液量为每瓶 25mL 发酵液和 25mL 有机溶剂,结果见表1。
在发酵过程中,石油醚、正己烷和乙酸乙酯挥发殆尽,说明他们不适合用于两相体系发酵;庚烷、辛烷、乙酸丁酯和异辛醇中产物含量非常低,对应的发酵液中产物浓度也极低,说明它们也不适合用于两相体系发酵。
油酸作为有机溶剂时产物浓度最高,生物量最多。这是因为油酸不但具有合适的底物和产物的分配,而且生物相容性好,其它的几种溶剂都不能同时具备这2个条件。
3.2 水/油酸两相体系与水相体系的反应过程比较
比较了在水溶液体系和水/油酸两相体系中马克斯克鲁维酵母细胞转化L-苯丙氨酸生成β-苯乙醇的反应,结果如图 6 所示。水溶液体系为发酵液50 mL,两相体系为油酸和发酵液的体积各为25 mL。
尽管在水溶液体系中的传质限制要小于两相体系。但在水溶液体系中产物浓度过高对酵母细胞的毒性较大,严重抑制了酵母细胞的生长。在两相体系中,产物大部分溶于油酸相中,使其在水相中的浓度保持较低水平,这样就减少了对细胞的毒性和抑制作用。而且油酸能原位萃取产物,使反应平衡发生移动,从而使反应顺利进行,产物浓度得以提高。因此水/油酸两相体系中的产物浓度明显高于水溶液中的产物浓度。在优化条件下进行验证实验,摇瓶培养实验测得的数据为1533±11mg/L,实验值与理论预测值非常接近,可见该模型可以较好的预测实际发酵情况,模型与实际情况的吻合度非常好。也证明了响应面法用于优化马克斯克鲁维酵母AS2.1440液体发酵生产天然香料β-苯乙醇的可行性。
两相体系发酵的β-苯乙醇产量比水相体系的产量提高了102.91%。
本文首先利用Plackett-Burman 实验设计,对影响马克斯克鲁维酵母AS2.1440转化L-苯丙氨酸生产β-苯乙醇产量的诸多相关因子进行了评价,成功的筛选出显著影响β-苯乙醇产量的液体培养条件因素,省时省力,快速有效。在P-B 筛选实验基础上,对重要影响因素进行最陡爬坡实
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在发酵过程中,石油醚、正己烷和乙酸乙酯挥发殆尽,说明他们不适合用于两相体系发酵;庚烷、辛烷、乙酸丁酯和异辛醇中产物含量非常低,对应的发酵液中产物浓度也极低,说明它们也不适合用于两相体系发酵。
油酸作为有机溶剂时产物浓度最高,生物量最多。这是因为油酸不但具有合适的底物和产物的分配,而且生物相容性好,其它的几种溶剂都不能同时具备这2个条件。
3.2 水/油酸两相体系与水相体系的反应过程比较
比较了在水溶液体系和水/油酸两相体系中马克斯克鲁维酵母细胞转化L-苯丙氨酸生成β-苯乙醇的反应,结果如图 6 所示。水溶液体系为发酵液50 mL,两相体系为油酸和发酵液的体积各为25 mL。
尽管在水溶液体系中的传质限制要小于两相体系。但在水溶液体系中产物浓度过高对酵母细胞的毒性较大,严重抑制了酵母细胞的生长。在两相体系中,产物大部分溶于油酸相中,使其在水相中的浓度保持较低水平,这样就减少了对细胞的毒性和抑制作用。而且油酸能原位萃取产物,使反应平衡发生移动,从而使反应顺利进行,产物浓度得以提高。因此水/油酸两相体系中的产物浓度明显高于水溶液中的产物浓度。在优化条件下进行验证实验,摇瓶培养实验测得的数据为1533±11mg/L,实验值与理论预测值非常接近,可见该模型可以较好的预测实际发酵情况,模型与实际情况的吻合度非常好。也证明了响应面法用于优化马克斯克鲁维酵母AS2.1440液体发酵生产天然香料β-苯乙醇的可行性。
两相体系发酵的β-苯乙醇产量比水相体系的产量提高了102.91%。
本文首先利用Plackett-Burman 实验设计,对影响马克斯克鲁维酵母AS2.1440转化L-苯丙氨酸生产β-苯乙醇产量的诸多相关因子进行了评价,成功的筛选出显著影响β-苯乙醇产量的液体培养条件因素,省时省力,快速有效。在P-B 筛选实验基础上,对重要影响因素进行最陡爬坡实
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