实验采用的是低初糖浓度、高温、高搅拌、通风发酵。低初糖浓度，有利于菌体生长，但高初糖浓度则有抑制作用；高温有利于碳源更多转化为菌体，但温度太高不利于HA合成；高搅拌改善传质传氧，利于营养物质进入细胞，但搅拌产生很大的剪切力，伤害细胞，影响丝状HA分子量；氧能使丙酮酸更多地被氧化成乙酸，从而得到更多的能量，但若不能控制pH，大量乳酸、乙酸会抑制菌体的浓度[15]。
实验过程：3h进入对数生长期（糖耗明显加快，菌液味道有点变酸-有乳酸产生，测pH，pH下降，呈弱酸性）；13h菌体量最高（测菌浓发现数值达到最大值）；32h HA 产量最高(菌液明显变粘，并有浓厚的香甜气味)。
初糖浓度对菌体生长的影响：在控制PH的情况下，低初糖浓度，菌体生长延迟期短，启动快。从底物消耗看，低初糖浓度，菌体能很快进入高糖耗阶段。低初糖发酵时间短、生产强度高。
初糖浓度对产物生成的影响：HA合成与菌体生长偶联，HA合成延迟期与菌体生长延迟期一致。细胞干重和HA产量随初糖浓度增加而增加。但HA产率随初糖浓度提高而迅速下降。高初糖下，HA在发酵后期受到强烈抑制。
本实验控制初始加蔗糖20g/L用于种子的培养，在此适中的低初糖浓度下，菌体能很快的进入高糖耗阶段，数量大幅度增长，从而大大地缩短了种子培养的时间（从原方案的11小时降到了8小时）。在发酵过程开始培养基中加蔗糖50g/L，并加入1.6kg的葡萄糖；过程中采用流补的方式补加葡萄糖以补充消耗的糖。这样既保证了菌体有足够的糖，又不会因为高糖浓度而抑制菌体代谢。


本生物化学毕业设计“微生物发酵法生产HA的研究”论文由清风毕业设计网[www.lunwen550.com]征集整理！