
微生物转化发酵法生产天然香料β-苯乙醇的研究
作品编号:SWHX0309 开发环境: WORD全文:26页 论文字数:11000字 此微生物转化发酵法生产天然香料β-苯乙醇的研究毕业设计完整版包含[论文] |
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对以上两种不同培养基培养的菌种的发酵液进行发酵结束后,经0.22um微孔滤膜过滤后,上高效液相色谱予以分析,最后产生结果。
将待测样品进样前用0.22um微孔滤膜过滤处理,滤液立即上HPLC分析,检测波长260nm,柱温30oC ,流动相流速1mL/min,流动相为甲醇:水=0.5:0.5(v/v),等浓度洗脱。
配制底物和产物对照品的标准溶液,稀释成一系列不同浓度,每次进样10uL,以峰面积对对照品浓度作图,绘制标注准曲线
连续进样同一样品5次,测定精密度。
向一适度浓度的样品中加入不同浓度的底物和产物的标准溶液,测定加样回收率。
初筛菌株发酵液经0.22um微孔滤膜过滤后,直接上HPLC分析检测,比较发酵结果。
在所考察的酵母菌种中,大多数都具有转化L-苯丙氨酸生成β-苯乙醇的能力,但不同的环境其转化能力在程度、上有所差别。
通过培养皿划线培养观察,克鲁维氏酵母的菌种菌落特征为:菌落较大(直径6mm左右)而厚,中央凸起,呈乳白色,光滑,有光泽,边缘整齐,易挑起,外观较稠,不透明。培养时间过长,菌落会因干燥而生皱。菌落有股诱人的酒香味。
将 L-苯丙氨酸和β-苯乙醇对照品分别溶解于超纯水和甲醇中,制备成浓度
约 5.0g/L、0.8g/L 的溶液,在 200~400nm 的波长范围内进行紫外光全波扫描,图谱显示:L-苯丙氨酸和β-苯乙醇在 218nm、260nm 附近有 2 个紫外吸收峰。实验中以 218nm 为检测波长时干扰较大,260nm 时色谱图基线平稳、峰形良好,故
选择 260nm 作为检测波长。
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向一适度浓度的样品中加入不同浓度的底物和产物的标准溶液,测定加样回收率。
初筛菌株发酵液经0.22um微孔滤膜过滤后,直接上HPLC分析检测,比较发酵结果。
在所考察的酵母菌种中,大多数都具有转化L-苯丙氨酸生成β-苯乙醇的能力,但不同的环境其转化能力在程度、上有所差别。
通过培养皿划线培养观察,克鲁维氏酵母的菌种菌落特征为:菌落较大(直径6mm左右)而厚,中央凸起,呈乳白色,光滑,有光泽,边缘整齐,易挑起,外观较稠,不透明。培养时间过长,菌落会因干燥而生皱。菌落有股诱人的酒香味。
将 L-苯丙氨酸和β-苯乙醇对照品分别溶解于超纯水和甲醇中,制备成浓度
约 5.0g/L、0.8g/L 的溶液,在 200~400nm 的波长范围内进行紫外光全波扫描,图谱显示:L-苯丙氨酸和β-苯乙醇在 218nm、260nm 附近有 2 个紫外吸收峰。实验中以 218nm 为检测波长时干扰较大,260nm 时色谱图基线平稳、峰形良好,故
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