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一株新分离微生物合成天然色素研究

作品编号:SWHX0100 开发环境: WORD全文:31页 论文字数:13000
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为了提高菌株的产色素能力,对菌株的发酵条件进行了优化,结果表明最佳条件为:玉米粉30 g/L、蛋白胨1 g/L、L-酪氨酸2.5 g/L,pH 8.0,在30℃、转速为200 r/m,在此条件下,黑色素产量达到3.63 g/L,是初始发酵条件下的1.47倍。将发酵生产的色素提纯后,低温烘干得到黑色固体粉末状,在200-800nm波长范围内进行紫外-可见光扫描,发现该色素的最大吸收波为415nm。该色素易溶于碱溶液(pH11),微溶于甲醇、氯仿和碱溶液(pH8),但是难溶于乙醚、水和酸溶液。 最后,对菌株所产的黑色素稳定性进行了初步研究,结果表明该黑色素在高温和紫外线照射下,具有良好的稳定性;但是在长时间阳光直射下,其稳定性下降;同时随着pH值的升高,该黑色素的溶解性不断升高,在pH为1-2时可以产生沉淀,在酸的条件下,黑色素基本上不溶解,到pH8以后黑色素开始溶解,随着pH值的升高,黑色素的溶解性更好。此菌株所产黑色素还具有良好的耐氧化性和还原性。
取沙土管中心部分一些较湿润的裼色物质,在查氏培养基上进行反复分离纯化,得到的纯菌落,在查氏平板培养初期,菌丝为白色,菌丝与培养基结合紧密,在培养后期,菌落有皱褶,菌丝分泌大量的黑色素,使整个平板都被染黑,其菌落形态见图1。
由图4可知,经过1-2d的延迟期后,菌体进入对数生长期,开始大量生长,至6d后进入稳定期,菌丝生长量不再增加,在查氏培养基中菌体的稳定期较长,这对次级代谢产物的积累可能非常有利,至第11d后,菌体进入衰亡期。黑色素在第4d开始大量合成,至第11d达到最高。色素为微生物的次级代谢产物,一般在对数生长期后期开始合成,这与新种的生长曲线相一致。
通过显微镜对菌丝体观察,发现菌丝体内有大量的油滴,说明菌体在生长过程中能积累油脂,这可能与菌体在沙漠的生长环境有关,对菌体中的油脂含量进行测定,其含量为30%,属于油脂高产菌株,但油脂的种类不明,这也是下一步研究的重点之一。
将菌株接种到种子培养基,30℃摇床振荡培养6d,分别移接到无碳源、无氮源平板及无碳源、无氮源液体培养基中,观察菌体的生长和产色素的情况,结果见图6、图7。

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