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β-胡萝卜素发酵培养基的优化

作品编号:SWHX0093 开发环境: WORD全文:36页 论文字数:13800
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[TAGS:β-胡萝卜素,发酵 指数:]
本论文实验主要从发酵培养基内容的确定以及发酵条件的优化方面来考察。首先研究了培养基成分对三孢布拉氏霉发酵产β-胡萝卜素的影响,初步确定了以玉米淀粉作为碳源,黄豆粉作为氮源的发酵培养基配方。其次,通过不断地改变各种变量因子,来最终确定培养基各个成分的配比情况,如氮源浓度为3%,碳源浓度为3%,培养基pH值为7.0,植物油为35ml/L,KH2PO4 2g/L,MgSO4 1g/L,维生素B1 0.03g/L的情况。
配制标准溶液:称取β-胡萝卜素标准品0.010g,取2ml三氯甲烷溶解,再用石油醚定容于50ml的容量瓶中,得到200.00mg/L的标准液,再分别稀释成0.80mg/L,1.60mg/L,2.0mg/L,2.40mg/L,2.80mg/L,在450nm条件下测定吸光值。
配制标准溶液:称取番茄红素标准品0.010g,取2ml三氯甲烷溶解,再用石油醚定容于50ml的容量瓶中,得到200.00mg/L的标准液,再分别稀释成0.80mg/L,1.20mg/L,1.60mg/L,2.0mg/L,2.40mg/L,2.80mg/L,在471nm条件下测定吸光值。
称取麦芽汁培养基,配置成200ml的培养基。在电炉上加热至溶解,并用玻璃棒不断的搅拌。将上述培养基分装在三个干净的锥形瓶中,用纱布和报纸封口,包扎。洗干净12套平皿,用报纸包扎好。将锥形瓶和平皿都放置在121℃的灭菌锅中,灭菌20min。灭菌后,将他们放置在无菌操作台中,在无菌条件下,倒置平皿,每个大致为15ml。冷却。将保存的三孢布拉氏霉菌取出,在无菌操作台中,点燃酒精灯,用无菌的镊子取一块含有菌种的培养基放置在新的培养基中。其中
以碳源3%、氮源3%、pH为7.0来配置发酵培养基,之后向其中添加不同浓度、不同产品的表面活性剂。配置司班20、司班40、OP乳化剂、吐温80的1‰、0.5‰浓度的培养基各四组以及两组对照组。然后将配置好的培养基放入灭菌锅中灭菌,之后按照以前的步骤进行培养和测定。计算出能够促进菌体产β-胡萝卜素的量以及表面活性剂。
很明显的,两个不同的强度450nm和471nm下的正态分布曲线都有很好的增减趋势,而且较好的符合正态分布的区域。
结合实验过程和结果分析,我们认为是3%含量的玉米淀粉更加有利于菌体的生长,但相对其他的含量也有高的趋势,3%的稳定性高些,也更能满足我们的需求,所以在以后的发酵实验中,选择3%的玉米淀粉作为碳源。

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