
固定化酶水解带鱼蛋白的初步工艺研究
作品编号:SWHX0245 开发环境: WORD全文:26页 论文字数:11000字 此固定化酶水解带鱼蛋白的初步工艺研究毕业设计完整版包含[论文] |
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为了检测固定化酶和游离酶在水解效果上的具体差异,设计了以下实验。
取经过灭菌的浓度为5.0%的海藻酸钠溶液50mL,再加入游离酶的酶量为0.75g,制成固定化酶。
再取已经经过预处理的鱼糜50g两份,分别放到两个锥形瓶中。其中一个锥形瓶中加入制备好的固定化酶,贴上标签1。另一个锥形瓶中加入游离态的木瓜蛋白酶0.75g,贴上标签2。把两个锥形瓶中的溶液量都定容到50mL。
把两个锥形瓶放到同一个摇床中摇动。摇床的温度控制在50oC,转速控制在100r/min。设定水解时间为5h。
水解5h后,过滤掉滤渣,得滤液。精确量取水解液10mL,通过双指示剂甲醛滴定法滴定,计算出氨基酸氮的含量,结果如表1所示。
在滤渣中加入清水,清洗掉固定化酶中残留的未水解的鱼蛋白,把清洗过的固定化酶加入到锥形瓶中,备用。把使用过一次的酶替代新加入的酶,其他条件不变,重复上一次的操作。
从表2中可以得知固定化酶在多次使用过程中,酶的活性变化不是很大。
首先,第一次和第二次酶水解效果相对的比较差,分析原因可能是这两次酶是新固定的,和载体海藻酸钠结合的比较实,在小球状的固定化酶的中间微孔的酶的活性没有很好的被利用,导致水解效果相对的比较差点。
而实验到第六次的时候,固定化酶基本上都破裂成两半了,相对接触面积大了,不过破裂的固定化酶可能在过滤的时候被过滤掉,相当于酶的量减少了,水解效果也会相应的减弱一点。
在实验进行到第七次的时候,可能当时破裂成两半的固定化酶在水解过程中破裂的更加厉害,接触面积也增大了,水解效果会好一点。
综上所述,可以得知酶的活性并没有因实验次数的增多而大幅度的降低,实验说明了酶在固定后,酶的作用效果可以延续到酶破裂为止还有活性,只是在破碎后,固定化酶过滤不出来了。
为了检测载体海藻酸钠浓度的不同对固定化酶水解带鱼蛋白的效果上的差异,设计了以下实验。
取3瓶经过灭菌的浓度分别为4.5%、5.0%、5.5%的海藻酸钠溶液50mL,在3瓶中各加入游离酶的酶量为0.75g,分别在锥形瓶上标上1、2、3,制成3瓶不同海藻酸钠浓度的固定化酶。
再取3份已经经过预处理的鱼糜50g,分别放到3个锥形瓶中。将3个锥形瓶中的溶液量都定容到50mL。
将3个锥形瓶放到同一个摇床中摇动。摇床的温度控制在50oC,转速控制在100r/min。设定水解时间为5h。
水解5h后,过滤掉滤渣,得滤
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取经过灭菌的浓度为5.0%的海藻酸钠溶液50mL,再加入游离酶的酶量为0.75g,制成固定化酶。
再取已经经过预处理的鱼糜50g两份,分别放到两个锥形瓶中。其中一个锥形瓶中加入制备好的固定化酶,贴上标签1。另一个锥形瓶中加入游离态的木瓜蛋白酶0.75g,贴上标签2。把两个锥形瓶中的溶液量都定容到50mL。
把两个锥形瓶放到同一个摇床中摇动。摇床的温度控制在50oC,转速控制在100r/min。设定水解时间为5h。
水解5h后,过滤掉滤渣,得滤液。精确量取水解液10mL,通过双指示剂甲醛滴定法滴定,计算出氨基酸氮的含量,结果如表1所示。
在滤渣中加入清水,清洗掉固定化酶中残留的未水解的鱼蛋白,把清洗过的固定化酶加入到锥形瓶中,备用。把使用过一次的酶替代新加入的酶,其他条件不变,重复上一次的操作。
从表2中可以得知固定化酶在多次使用过程中,酶的活性变化不是很大。
首先,第一次和第二次酶水解效果相对的比较差,分析原因可能是这两次酶是新固定的,和载体海藻酸钠结合的比较实,在小球状的固定化酶的中间微孔的酶的活性没有很好的被利用,导致水解效果相对的比较差点。
而实验到第六次的时候,固定化酶基本上都破裂成两半了,相对接触面积大了,不过破裂的固定化酶可能在过滤的时候被过滤掉,相当于酶的量减少了,水解效果也会相应的减弱一点。
在实验进行到第七次的时候,可能当时破裂成两半的固定化酶在水解过程中破裂的更加厉害,接触面积也增大了,水解效果会好一点。
综上所述,可以得知酶的活性并没有因实验次数的增多而大幅度的降低,实验说明了酶在固定后,酶的作用效果可以延续到酶破裂为止还有活性,只是在破碎后,固定化酶过滤不出来了。
为了检测载体海藻酸钠浓度的不同对固定化酶水解带鱼蛋白的效果上的差异,设计了以下实验。
取3瓶经过灭菌的浓度分别为4.5%、5.0%、5.5%的海藻酸钠溶液50mL,在3瓶中各加入游离酶的酶量为0.75g,分别在锥形瓶上标上1、2、3,制成3瓶不同海藻酸钠浓度的固定化酶。
再取3份已经经过预处理的鱼糜50g,分别放到3个锥形瓶中。将3个锥形瓶中的溶液量都定容到50mL。
将3个锥形瓶放到同一个摇床中摇动。摇床的温度控制在50oC,转速控制在100r/min。设定水解时间为5h。
水解5h后,过滤掉滤渣,得滤
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