
积雪草多糖的提取及其抗氧化性能研究
作品编号:SWHX0478 开发环境: WORD全文:23页 论文字数:8700字 此积雪草多糖的提取及其抗氧化性能研究毕业设计完整版包含[论文] |
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目前对积雪草的研究还比较少,只是对其提取物的药效做过一些实验和研究,但其中具体的有效成分尚未被分离和单独研究过。由于积雪草多糖的研究文献报道较少,而多糖又是一种功能性很强的高分子化合物,在日常生活中有广泛的应用,鉴于积雪草价格低廉及多糖的种种功效,本实验以积雪草为原料,初步研究建立了积雪草多糖的提取工艺,并对得到的积雪草多糖进行了糖含量的测定,分离纯化研究及抗氧化活性研究,以期为以后积雪草多糖的深入研究提供一定的理论基础。
由2.3.4脱蛋白后得到积雪草粗多糖。苯酚-硫酸试剂可与游离的或寡糖、多糖中的己糖、糖醛酸(或甲苯衍生物)起显色反应,吸收值与糖含量呈线性关系。故本实验通过苯酚-硫酸法测定粗多糖的多糖含量。本法简便,显色稳定,灵敏度高,重现性好。
(一) 试剂配制
葡萄糖标准溶液: 准确称取葡萄糖10 mg溶于250 ml容量瓶中,加水至刻度定容。
6%苯酚溶液:6 g苯酚(分析纯重蒸馏试剂)加94 g水使之溶解,可放置与冰箱中避光长期储存。
(二) 实验步骤
(1)制作标准曲线:分别吸取0.4 ml,06 ml,0.8 ml,1. 0 ml,1.2 ml,1.4 ml,1.6 ml及1.8 ml,各类蒸馏水补到2.0 ml,然后分别加入6%苯酚溶液1.0 ml,浓硫酸5.0 ml,静置10 min,摇匀,室放置20 min后,于490 nm测定吸光度。以2.0 ml蒸馏水同样显色操作为空白,进行比色。以吸光度为纵坐标,糖含量微克为横坐标,绘制标准曲线。
(2)样品糖含量测定:精确称取5 mg于250 ml容量瓶中,加水定容至刻度,准确吸取2 ml至试管内,然后加入6%苯酚溶液1.0 ml,浓硫酸5.0 ml,静至10 min,摇匀,室温放置20 min以后,于490 nm测定光密度,以标准曲线与回归方程计算多糖含量。
称取多糖样品2 mg,加入4 mL三氟乙酸(2 mol/L)于密封的试管中,100℃水解5 h,水解液减压浓缩至干以除尽三氟乙酸(蒸馏水作为辅助)。然后加入0.1 NaOH (3 mL)和6 mg NaBH ,密封放置过夜。在反应液中加入2滴醋酸分解过量的NaBH ,减压蒸干,依次用1:100的盐酸-甲醇溶液和甲醇溶液
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由2.3.4脱蛋白后得到积雪草粗多糖。苯酚-硫酸试剂可与游离的或寡糖、多糖中的己糖、糖醛酸(或甲苯衍生物)起显色反应,吸收值与糖含量呈线性关系。故本实验通过苯酚-硫酸法测定粗多糖的多糖含量。本法简便,显色稳定,灵敏度高,重现性好。
(一) 试剂配制
葡萄糖标准溶液: 准确称取葡萄糖10 mg溶于250 ml容量瓶中,加水至刻度定容。
6%苯酚溶液:6 g苯酚(分析纯重蒸馏试剂)加94 g水使之溶解,可放置与冰箱中避光长期储存。
(二) 实验步骤
(1)制作标准曲线:分别吸取0.4 ml,06 ml,0.8 ml,1. 0 ml,1.2 ml,1.4 ml,1.6 ml及1.8 ml,各类蒸馏水补到2.0 ml,然后分别加入6%苯酚溶液1.0 ml,浓硫酸5.0 ml,静置10 min,摇匀,室放置20 min后,于490 nm测定吸光度。以2.0 ml蒸馏水同样显色操作为空白,进行比色。以吸光度为纵坐标,糖含量微克为横坐标,绘制标准曲线。
(2)样品糖含量测定:精确称取5 mg于250 ml容量瓶中,加水定容至刻度,准确吸取2 ml至试管内,然后加入6%苯酚溶液1.0 ml,浓硫酸5.0 ml,静至10 min,摇匀,室温放置20 min以后,于490 nm测定光密度,以标准曲线与回归方程计算多糖含量。
称取多糖样品2 mg,加入4 mL三氟乙酸(2 mol/L)于密封的试管中,100℃水解5 h,水解液减压浓缩至干以除尽三氟乙酸(蒸馏水作为辅助)。然后加入0.1 NaOH (3 mL)和6 mg NaBH ,密封放置过夜。在反应液中加入2滴醋酸分解过量的NaBH ,减压蒸干,依次用1:100的盐酸-甲醇溶液和甲醇溶液
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