分别称取0.0050g待测物溶于乙醇，定容至25mL。
取25mL容量瓶5个，加3mL Tris-HCl缓冲液、3mL NADH和3mL NBT，再分别加入待测物溶液1mL、2mL、3mL、4mL、5mL于容量瓶中，最后加入3mL PMS，静置5min后定容至25mL，以水为空白，于560nm下测吸光度A值。
（2）DPPH自由基清除法
称取0.0050g待测物溶于乙醇，定容至25mL。
取25mL容量瓶5个，分别加入0.5mL、1mL、1.5mL、2mL、2.5mL待测物溶液于容量瓶中，再加入1mL DPPH溶液，静置30min。以水为空白，于516nm下测吸光度A值。
（3）羟自由基Fenton反应比色法
在25mL容量瓶中加5.0mL pH=7.4的磷酸盐缓冲液，5.0mL 50g/mL的番红花红，0.5mL不同浓度的供试液，5.0mL 3%的过氧化氢 (新鲜配置)，2.5mL 2mmol/L EDTA-Fe(Ⅱ)（新鲜配置），用二次蒸馏水标定至刻度，混合均匀后于37℃水浴中反应30min，在520nm处测定吸光度。空白组以二次蒸馏水代替供试液，对照组以二次蒸馏水代替EDTA-Fe(Ⅱ)和供试液，并按下式计算清除率：                    清除率=(A样品-A空白)•(A对照-A空白)-1 其中:A样品是加入样品后的吸光度，A空白是未加样品的吸光度，A对照是未加样品和EDTA-Fe(Ⅱ)的吸光度。
在对这2个主要化合物的抗氧化活性研究时，选择其溶解体系，通过上述3种方法的测定，比较这2个化合物和对照品活性的高
在本次实验中，黄酮类物质、乌索酸、对照品在一定程度上都能清除自由基，但这3种物质对各自模型研究时表现出来的数据结果的波动性很大。在超氧阴离子自由基（O2-•）清除中，黄酮类物质体现出良好的上升趋势，佳于对照品2,6-二叔丁对甲酚的数据，而乌索酸对该模型显示不出明显的作用。在DPPH清除自由基过程中，黄酮类物质、对照品特丁基对苯二酚对该模型没有显著的作用，乌索酸的作用也不是很突出。而利用羟自由基Fenton反应比色法，测定黄酮类物质和


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