皂苷传统的精制与分离方法有溶剂萃取法、醇-醚沉淀、铅沉淀法、吸附法、色谱分离法。因积雪草苷是水溶性物质，根据根据积雪草苷的理化性质，对粗提物采取石油醚、乙酸乙酯、正丁醇依次分步萃取的方法，使积雪草苷集中在正丁醇溶解部分，因而达到去除浸膏中的脂溶性成分、挥发油及其它杂质成分的目的，即可得到积雪草苷含量较为集中的粗提物[5]。经过萃取分离后的积雪草苷粗提物纯度仍不能达到要求，因此进一步纯化是及其必要的。采用硅胶层析柱再次分离纯化的方法，能得到纯度较高的、能满足研究需要的积雪草苷成品。
本文通过两条分离纯化路线：石油醚-乙酸乙酯-正丁醇溶剂系统萃取；以及另一条路线氯仿-正丁醇溶剂系统萃取。并对这两条路线所得积雪草苷出品进行含量和提取率的比较。
本文首先建立HPLC对积雪草苷的检测方法并对此方法作出评价，因其具有分离效果好、精密度高、准确、快速、样品制备简单等优势，是对积雪草苷定性的分析及含量测定的首选现代分析方法。
另外本文采用薄层色谱法对积雪草苷粗品进行检测，摸索不同展开剂及其配比对积雪草苷粗品的分离情况，选择分离效果好，环保经济的展开剂及其配比作为后续的柱层析色谱纯化工艺提供依据。
标准样品制备：精密称取积雪草苷对照品 0.0326g，置于 10ml量瓶中，加甲醇溶解至刻度线定容，混匀得到对照品贮备液备用。
标准曲线溶液的配置：以此贮备液为母液，精密吸取母液依次稀释1/6、2/6、3/6、4/6、5/6、6/6倍分别配成标准曲线溶液1，2，3，4，5，6六个小样。
实验步骤：在室温为25℃，流动相乙腈：水=0.5:0.5v/v，流速为 1.0ml/min，紫外检测波长为200nm条件下，用微量进样器吸取上述对照品溶液各 10μL，注入液相色谱仪测定实验数据。
精密吸取积雪草苷对照品溶液，按上述色谱条件进行分析，连续进样 6次，每次进样 10μL，测定积雪草苷色谱峰面积。
精密吸取积雪草苷对照品溶液，按上述色谱条件于 0h、2h、4h、6h、8h 时，分别进样 10μl，测定积雪草苷峰面积。


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