斜面培养菌种7天，挖块接种至250 mL种子瓶（装液量20%，V/V，下同）培养40小时，按10%（V/V）接种量接入装液（发酵培养基）20%的500 mL摇瓶。在28℃，200 r/min下培养。在发酵之前添加0.1%（w/w）嘧啶类前体，继续培养5 d。在整个发酵过程中，培养温度均为28℃。
米多霉素胞嘧啶衍生物是水溶性的胞外产物，在发酵结束后，向发酵液中加入草酸，至pH值为2.5-3，4000 rpm离心分离，上清液调pH值至7.5，静置10min，抽滤，得到棕褐色外观澄清的溶液。
（1）新树脂用去离子水漂洗除杂，再用去离子水充分浸泡12-24h；
（2）约2倍树脂体积2mol/L盐酸浸泡4-8h，去离子水冲洗至中性；
（3）约2倍树脂体积2mol/L氢氧化钠浸泡4-8h，去离子水冲洗至中性；
（4）定型：阳离子交换树脂用盐酸转成H型，阴离子交换树脂用氢氧化钠转成OH型，去离子水洗中性后备用。
先将预处理后的各离子树脂用去离子水冲洗，至pH为中性，然后用真空抽滤除去表面的水。接着准确称取2.0g阳离子交换树脂DK110、HZ011、HD-8、732、JK110、D001、HD-2、HZ001放入锥形瓶中，加入50mL一定浓度、一定pH值的发酵液，置于转速为200rpm和温度为室温的摇床中，振荡3小时后，各取0.5mL溶液，稀释10倍。测定溶液中米多霉素胞嘧啶衍生物的浓度，计算静态吸附容量。
q=（c-c0） *V/w                           （2.1）
式中            q：湿基树脂的静态吸附容量，（mg/g湿树脂）；
c0：发酵液中的米多霉素胞嘧啶衍生物初始浓度，（mg/mL）；
c：平衡时发酵液中米多霉素胞嘧啶衍生物的浓度，（mg/mL）；
V：发酵液的体积，（mL）；
w：湿基树脂的重量，（g）。
洗脱工艺的解吸率公式如下：
            解吸率（%）=（V*c/m）*100               （2.2） 
式中            c：平衡时发酵液中米多霉素胞嘧啶衍生物的浓度，（mg/mL）；
V：发酵液的体积，（mL）；
m：树脂饱和吸附质量，（g）。
将预处理后的DK110、HD-2用去离子水冲洗至pH为中性，用真空抽滤除去表面的水。接着各准确称取两份2.0gDK110、HD-2于四个锥形瓶中，加入50mL一定浓度，一定pH值的发酵液，置于转速为200rpm和温度为室温的摇床中，分别在10、20、30、50、70、100min时各取一支0.5mL溶液，


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