
磁性纳米固定化淀粉酶研究
作品编号:SWHX0474 开发环境: WORD全文:23页 论文字数:10000字 此磁性纳米固定化淀粉酶研究毕业设计完整版包含[论文] |
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固定化酶是酶工程的核心内容之一。游离酶一般都溶于水,其本身也不稳定,利用后分离困难,造成浪费。若将酶固定于各种载体上,就可以很方便地分离和重复利用,对提高酶的利用效率,延长使用时间具有重要意义。然而固定化酶的性能取决于固定化酶的固定化方法以及所使用的载体材料的性质[3]。
本文主要是用磁性纳米载体来固定化酶,运用用有机-无机纳米复合材料技术,将纳米级氧化铁和四氧化三铁与氨基硅烷螯合,制成氨基硅烷-Fe3O4纳米复合材料;再以戊二醛作为交联剂,将淀粉酶固载上去,形成固定化酶。计算固定化淀粉酶的固载率,比较固定化酶和自由酶的活性以及比较固定化酶和自由酶的贮存稳定性。
为了检测固定化酶和游离酶初次的活性差异,根据2.3淀粉酶活性测定中的实验步骤及表2,设计了以下实验。即:
分别量取100ml底物缓冲液置于烧杯,在40℃下,水浴预热5min;加入酶,充分混匀,4040℃下,水浴预热10min,再从各个烧杯中取出1.2ml的样品酶液,置于小试管,分别加入碘稀释液1.0ml和去离子水5ml。于660nm波长处(lcm光径),以去离子水调吸光度为零,读各管吸光度,每只试管做2只平行试管。
根据3.1酶固载率的结论,即
所测定的吸光度与酶活力单位(见表6):
图6中从上到下,第一条曲线是Fe2O3-淀粉酶,第二条是Fe3O4-淀粉酶,第三条是游离态酶的酶活力。从中可见固定化酶与游离酶活性均随着时间延长而降低,其中自由酶较固定化酶变化剧烈。上图表明经固定化后淀粉酶,结构不易发生改变,活性损失较小;在2天以内,固定化酶和游离酶的变化较少,而
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本文主要是用磁性纳米载体来固定化酶,运用用有机-无机纳米复合材料技术,将纳米级氧化铁和四氧化三铁与氨基硅烷螯合,制成氨基硅烷-Fe3O4纳米复合材料;再以戊二醛作为交联剂,将淀粉酶固载上去,形成固定化酶。计算固定化淀粉酶的固载率,比较固定化酶和自由酶的活性以及比较固定化酶和自由酶的贮存稳定性。
为了检测固定化酶和游离酶初次的活性差异,根据2.3淀粉酶活性测定中的实验步骤及表2,设计了以下实验。即:
分别量取100ml底物缓冲液置于烧杯,在40℃下,水浴预热5min;加入酶,充分混匀,4040℃下,水浴预热10min,再从各个烧杯中取出1.2ml的样品酶液,置于小试管,分别加入碘稀释液1.0ml和去离子水5ml。于660nm波长处(lcm光径),以去离子水调吸光度为零,读各管吸光度,每只试管做2只平行试管。
根据3.1酶固载率的结论,即
所测定的吸光度与酶活力单位(见表6):
图6中从上到下,第一条曲线是Fe2O3-淀粉酶,第二条是Fe3O4-淀粉酶,第三条是游离态酶的酶活力。从中可见固定化酶与游离酶活性均随着时间延长而降低,其中自由酶较固定化酶变化剧烈。上图表明经固定化后淀粉酶,结构不易发生改变,活性损失较小;在2天以内,固定化酶和游离酶的变化较少,而
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