如图所示，在巨噬细胞中，ACAT-1在泡沫细胞的形成过程中起重要作用；小肠细胞内，ACAT-2主要负责胆固醇的吸收，ACAT-1 与 ACAT-2 共同参与乳麋微粒的合成与装配过程；肝细胞中，主要为ACAT-1发挥功能，由ACAT-1 与 ACAT-2 共同催化产生的胆固醇酯对于VLDL的合成与装配起决定作用。
人酰基辅酶A：胆固醇酰基转移-1（ACAT-1）mRNA序列来自两条不同的染色体（1q25和7q31.3），含各自启动子P1和P7。 通过计算机单核苷酸多态性（SNP）分析，发现1号染色体对应的genomic DNA（Exon1～Exon16）中Exon10的1032位置上有一个外显子剪接增强位点（ESE），将其C突变成T后，SR蛋白不能与ESE结合而发生选择性剪接。有统计表明正常人Exon10 的1032位点大多为C，而冠心病（CHD）病人大多为T。首先从不同来源的CHD血样中克隆包涵Exon10的genomic DNA，测序分析1032位点的碱基。再利用Tetra-primer ARMS-PCR方法进行基因型分析。在成功构建人ACAT1 genomic DNA（Exon8～11）质粒的基础上再利用Nested PCR将Exon10 1032位点上的C突变成T，确保只有这一个点发生突变。
Human CHD血样实际没目录中那么多，且NCHD-NL-LT一栏全空。对已有的样品进行实验后虽然发现有些样品克隆失败，但成功返回的几个测序结果与初期假设较吻合，既Exon10 1032位点正常人大多为C，CHD病人为T。至于出现不少克隆失败的原因，从其他人那里了解极可能是抽血样时出现问题或样品存放过久。
这次的Nested PCR是在第二实验成功构建人ACAT1 genomic DNA（Exon8-11）质粒的基础上进行的。从拍的agarose gel来看，条带是我们所需要的。接大抽之后进行细胞转染，在细胞水平研究C/T互变与疾病的相关性。

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