
盘基网柄菌的固定化培养及其优化
作品编号:SWHX0468 开发环境: WORD全文:26页 论文字数:12000字 此盘基网柄菌的固定化培养及其优化毕业设计完整版包含[论文] |
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将AX3-pFH细胞接入新鲜HL-5C培养基中,在5L通气搅拌发酵罐中上罐培养。每隔6小时测定毛巾外的细胞浓度,PH值,DO值等盘基网柄菌的特性。通过对数据的归纳得出结论。
在四个250mL摇瓶中分别加入25mLHL-5C培养基以及0.8g毛巾,粒径大小约为5mm*5mm*5mm。接种盘基网柄菌细胞,使其初始浓度为0.5-1´105 mL-1,22 ℃、每分钟150转摇床振荡培养。159小时后开始测定,比较不同洗脱方式以确定毛巾内菌体浓度的测定方法。
将摇瓶中毛巾未吸收的液体小心倒出,再分别将吸满液体的毛巾小心转移至50ml离心管中。将四个离心管分为两组,分别多次用20mL磷酸盐缓冲液洗脱。其中第一组洗脱时采用多次以药匙挤压的方式,而第二组采用轻轻震荡的方式。洗脱完毕将毛巾外液体倒出,测定其中的菌体浓度。将各组测得的每次洗脱液的菌体浓度取平均值。
在11个250mL摇瓶中分别加入25mLHL-5C培养基,分别加入粒径大小约为5mm*5mm*5mm的0g、0.4g、0.4g、0.6g、0.6g、0.8g、0.8g、1.0g、1.0g、1.2g、1.2g毛巾。接种盘基网柄菌细胞,使其初始浓度为0.5-1´105 mL-1,22 ℃、每分钟150转摇床振荡培养。约160小时之后,测定毛巾内外菌体浓度以及葡萄糖浓度。
在500mL摇瓶中加入100mLHL-5C培养基,接种盘基网柄菌细胞,使其初始浓度为0.5-1´105 mL-1,22 ℃、每分钟150转摇床振荡培养。约140小时之后,菌体浓度基本达到要求。将摇瓶中菌液摇匀,测定菌体浓度,分装在5个250mL摇瓶中,各加入0.4g,0.6g,0.8g,1.0g干燥毛巾,放入22 ℃转速为150转/分钟的摇床中培养。在30分钟,60分钟,90分钟,150分钟,180分钟,240分钟,330分钟分别取出,摇匀吸取微量毛巾外菌液,测定其菌体浓度。
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