（1）将溶化的固体油脂培养基冷却至50℃左右时，充分摇荡，使油脂均匀分布。无菌操作倒入平板，待凝。（固体油脂培养基制作方法：蛋白胨10g、牛肉膏5g、NaCl 5g、花生油10g、1.6%中性红水溶液1mL、琼脂15~20g、蒸馏水1000mL、pH 7.2、121℃灭菌20min。注：不能使用变质油；油和琼脂及水先加热；调好pH后，再加入中性红；分装时，需不断搅拌，使油均匀分布于培养基中。）
（2）用记号笔在平板底部标注编号。
（3）将枯草芽孢杆菌在平板上划线接种。
（4）将平板倒置，于37℃温箱中培养24h。
（5）取出平板，观察菌苔颜色，如出现红色斑点，说明脂肪水解为阳性反应。
3.明胶水解试验
（1）取三支明胶培养基试管，用记号笔标明各管编号。（明胶培养基制作方法：牛肉膏蛋白胨液100ml、明胶12~18g、pH 7.2~7.4、在水浴锅中将上述成分溶化，不断搅拌。溶化后调pH 7.2~7.4。）
（2）用接种针取适量枯草芽孢杆菌分别穿刺接种于各管。
（3）将接种后的试管置于20℃中，培养2~5d。
（4）观察明胶液化情况。
4.石蕊牛奶试验
（1）取两支石蕊牛奶培养基试管，用记号笔标明各试管。（石蕊牛奶培养基制作方法：牛奶粉100g、石蕊0.075g、水1000mL、pH 6.8、121℃灭菌15min）
（2）将枯草芽孢杆菌分别接种于各试管。
（3）将接种后的试管置于35℃中，培养24~48h。
（4）观察培养基颜色变化。石蕊在酸性条件下为粉
由实验中各项数据可知，培养基的温度、起始pH值、装量、接种量的培养条件和培养基的组成对菌株的生长有很大的影响。通过单因子试验和正交试验方法，确定了枯草芽孢杆菌优化


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