分别取0.1g/L的葡萄糖溶液 0.4、0.8、1.2、1.6、2.0mL，用蒸馏水补到2.0mL，分别加入6.0mL蒽酮试剂，迅速浸于冰水浴中冷却，各管加完后一起于沸水中水浴，管口加盖玻璃球，以防蒸发。自水浴重新煮沸起，准确煮沸10min取出，用自来水冷却，室温放置10min左右，于620nm比色测其吸光度。以同样方法处理的重蒸馏水作为空白对照进行比色。以光密度为纵坐标，糖含量毫克数为横坐标(图2-1)，可以得到标准曲线Y=10.478X-0.0204,R2=0.9982。
准确称取褐藻糖胶10g，溶于30mL蒸馏水中，过滤除去不溶物；配置体积比4:1的氯仿—正丁醇溶液(氯仿相)；按样品体积:氯仿相体积3:1加入10mL氯仿相，置于具塞三角瓶中，于35℃充分振摇30min后，经离心机(4000r/min)离心1 min，然后将水相与氯仿相分开。连续3次后，合并氯仿相，加少量水洗涤，并分离。共洗涤三次，水相经考马思亮蓝法检测无蛋白质后浓缩上阴离子交换柱进行分级。
将经过去蛋白质并经浓缩的褐藻糖胶按方法2.8.2上DEAE-Sepharose Fast Flow离子交换柱进一步分级纯化，分别用Tris-HCl缓冲液，0.4mol/L NaCl的Tris-HCl缓冲液，0.8mol/L NaCl的Tris-HCl缓冲液，0.95mol/L NaCl的Tris-HCl缓冲液，1.2mol/L NaCl的Tris-HCl缓冲液依次进行洗脱，洗脱曲线如下：
本试验还对裙带菜褐藻糖胶进行了进一步研究，首先对提取的粗多糖利用CaCl2法进行纯化，褐藻糖胶得率达到56.8%，再用Sevag法去除褐藻糖胶中的蛋白质，三次重复操作后，考马斯亮蓝法检测褐藻糖胶中基本不含蛋白质。去除蛋白质后上DEAE-Sepharose Fast Flow离子交换柱进行组分分离。由于褐藻糖胶各组分中含有不同的硫酸根含量，用不同浓度的盐溶液进行洗脱，分管收集，每管收集7mL，用硫酸－蒽酮法追踪检测多糖含量变化，合并同一峰试管中的多糖溶液，透析后浓缩干燥得到五个组分。对五个组分用三氟乙酸水解后，进行糖睛乙酰衍生化，气相色谱测得多糖五个组分单糖组成及单糖峰面积比分别为：F1组分硫酸根含量为18.3%，主要含有甘露糖和半乳糖，峰面积比为1:3.22；F2组分硫酸根含量为19.2%，主要含有鼠李糖，岩藻糖，木糖，甘露糖，葡糖糖，半乳糖，峰面积比为1.41:2.07:1.56:1.04:1:1.07；F3组分硫酸根含量为30.1%，主要为岩藻糖；F3组分硫酸根含量为38.4%，主要含有岩藻糖和半乳糖，峰面


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