影响氨基酸螯合物合成工艺及稳定性的因素主要有配位比、pH值、反应的温度、时间等。一般金属离子的配位反应是一个室温下的快速反应，温度和时间对它的影响都不大[19]。适当加温只是为了提高甘氨酸的溶解度。为了避免无机铁的水解，反应物的浓度一般都比较高，甘氨酸溶解性受到一定影响，这里首先讨论在氨基酸螯合物合成合成后，萃取溶剂乙醇的用量的选择，再研究pH 值、抗氧化剂用量、配位比等对合成工艺的影响。
螯合物可在有机溶剂中沉淀析出，如果选择适当的铁源使游离金属离子溶于有机溶剂，就可以使螯合铁和游离铁分离，为进一步的提纯和检测提供可能。常见的亚铁盐有硫酸亚铁及氯化亚铁。下表比较了它们在不同的有机溶剂中的溶解情况。
表1.硫酸亚铁与氯化亚铁在不同有机溶剂中的溶解情况
从表中看出，在浓度50%到90%的乙醇溶液中，硫酸亚铁的溶解度变化不大，基本不溶。因此，用硫酸亚铁为铁源合成螯合铁，不能达到使游离金属离子和螯合物分离的目的。而氯化亚铁能完全溶于乙醇中，并且本实验研究表明三氯化铁也能溶于乙醇。这样，就可以用乙醇处理反应液，游离的Fe2+或Fe3+溶解在乙醇中，而螯合铁在乙醇中沉淀析出。因
此用氯化亚铁做铁源，可以实现有机铁和无机铁的分离，提高产品的纯度。
配位比即配位体与金属离子的摩尔数之比。它是影响金属离子与氨基酸配位反应的一个重要因素。配位比太小，不能形成稳定的环状结构，鳌合物不稳定;配位比太大，又会造成甘氨酸的浪费，不经济。从甘氨酸与碳酸亚铁合成反应的原理可以知道，二者的理论摩尔配位比为2:1。因此，本文以2:1作为基准，设计如下的对比试验，测定产物的产率、亚铁含量和总铁含量来确定其最佳配位比。其结果见表5。


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