1．当地原料奶中的嗜冷菌以阴性杆菌为主；在CVT培养基上呈现多种菌落特征。本实验分离鉴定出的杆菌3-1呈较湿润的暗红色，周边呈不规则状，且周围有一层较薄的半透明状的粘质。
2．嗜冷菌在20℃培养1-2d有可见菌落生成；在15℃培养3-5d有可见菌落生成；在4℃培养7-10d有可见菌落生成(除专性嗜冷菌5-6d)。
菌株的生化代谢特征且与相关文献中所报道的嗜冷菌的生化特性一致。
若甲基红（M.R）试验测试的是芽孢杆菌的细胞时，用5gNaCl代替K2HPO4，它有缓冲作用。
V-P测定加试剂后有时需要放置长时间才出现红色反应。
还原硝酸盐反应是在厌氧条件下进行的，实验中没有用矿油封液面，但分装试管时液层不宜太薄，尤其是对生长缓慢的细菌。对不同种的细菌来说，亚硝酸盐可以是硝酸盐还原的最终产物，也可以是整个还原过程的中间产物，有的种还原极为迅速，有的种还原缓慢，因而第一次检查反应结果要及时（以不超过一天为宜），对阴性反应的菌株应连续观察，并且对于未呈现亚硝酸盐反应的测定应检查是否仍有硝酸盐（二苯胺测定），然后才能判断有无硝酸盐的还原反应[12]。
吲哚试验中，若颜色不明显，可加4～5滴乙醚至培养液，摇动，使乙醚分散于液体中，将培养液静置片刻，等乙醚浮液面后再加吲哚试剂。如培养液中有吲哚时，吲哚可被提取在乙醚层中，浓缩的吲哚和试剂反应，则颜色明显[12]。
PCR操作必须在超净工作台上进行，且要避免样品间的相互污染。实验中设置了严格的阴性对照。前几次实验中曾出现扩增反应总是阴性结果的现象，通过增加酶的浓度，增加靶DNA浓度（由1μl增加至2μl），提纯样品（将粗制品的模板进行提纯），增加扩增次数等不断改变


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