本实验对以海藻酸钠为载体包埋固定化中性蛋白酶水解大豆蛋白进行了比较研究，确定了最佳工艺条件为初始pH8.0，温度40℃，海藻酸钠浓度为3%，底物浓度为14%，凝胶珠中酶量与海藻酸钠量比为1：3，固定化时间为2.5h。
标定：用邻苯二甲酸钾标定
精确称取预先在120℃烘干至恒重的邻苯二甲酸钾5.1057g，用蒸馏水溶解，并在容量瓶中稀释至250mL，摇匀，即成0.1N邻苯二甲酸钾标准溶液。吸取此标准溶液25mL,置于250mL三脚瓶中，加2滴1%酚酞指示剂，立即以未标定的NaOH溶液滴定至微红色，在半分钟内不褪色即打终点，记录所耗用NaOH溶液的量。如此标定3次，取平均植。按N1V1=N2V2公式计算当量浓度。  
包埋法操作比较简单，需要的条件要求少，比较适合小型实验的情况。
将中性蛋白酶与浓度为2%～4%的海藻酸钠均匀混合。用注射器到5%的氯化钙溶液中进行凝胶化反应，于4℃的冰箱中钙化一定时间，制备成直径约3mm的海藻酸钙凝胶珠，用无菌水清洗4次，以洗去白表面的CaCl2溶液，即得球状固定化颗粒。以上超作要在无菌工作台下进行。
由图5可知：海藻酸钠浓度过低，虽然游离氨基的峰值，可以达到较高水平，但是其可使用时间稍短，不利于固定化酶的反复使用，如2%浓度下，游离氨基峰值要高于3%浓度，这可能是因为在酶促反应期间底物和产物易通过凝珠微孔，反应速度较快。但其可是使用时间太少；海藻酸钠浓度过高，使用时间可以达到比较理想的状态，但是与外界的能量和物质的传递都受到了不小的障碍，酶的活性受阻，其游离氨基的峰值并不理想；而且当海藻酸钠浓度为4.0%时，由于溶液粘度较高，固定化时不易成球。当海藻酸钠浓度为3.0%时，虽然游离氨基的峰值有少许的降低，但是其可利用时间可达25d，符合反复使用的特性，凝珠的机械强度适宜，反应速度也较快。
海藻酸钠的固定化过程是一个化学反应过程：CaCl2溶液中的Ca2+通过海藻酸钠凝胶珠由外向内置换Na+而形成海藻酸钙，而置换反应是需要一定时间的，因此在条件不变的情况下分别对固定化时间2h,2.5h,3h进行比较研究如表2。

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