2.1 猪尿样品中Clen含量的快速检测
2.1.1 实验基本原理
基于抗体抗原反应的免疫学原理。检测所需原料的全部或大部分均已整合到免疫胶体金快速检测试剂中，当待测样品加到加样孔中后，由于微孔滤膜的毛细管作用，使抗原抗体反应在固相膜上快速进行，反应一般只需数分钟，其检测结果可用肉眼来判断，其显色反应是由于所标记胶体金的呈红色[4]。
2.1.5 检测试剂配比的确定及组装
将不同半抗原结合比、不同浓度的CLEN-BSA和不同OD值的盐酸克伦特罗多克隆抗体-胶体金复合物分别包被在硝酸纤维素膜和胶体金结合垫上，结合pH、硝酸纤维素膜等因素反复调试，使最终灵敏度达到所需要求。用点膜机把适当浓度的CLEN-BSA及羊抗鼠IgG喷在NC膜上，分别作为检测线（T）和控制线（C），在37℃烘箱干燥1h[9]。用同样方法，将制备好的金标记clen-BSA单克隆抗体包被在胶体金结合垫上。如图2所示。
检测试剂组成为一个PVC背衬，在其上按顺序粘上样品垫、胶体金结合垫、硝酸纤维素膜和吸水垫。用切割机将贴好的板切割成4mm宽的细条，装入模板中制成检测试剂，然后放入带干燥剂的铝箔袋中密闭储存。
1、取7支干净的5ml试管，按表2加入标准BSA溶液和蒸馏水，完成后再每
支加5ml考马斯亮蓝溶液。
2、紫外分光光度计测前先预热30min，波长调到595nm处,测出1的7个样品的OD值。
3、以标准BSA溶液含量分数为横坐标，各OD值为纵坐标，在坐标轴上绘制标准曲线。利用标准曲线查出回归方程。
（三）蛋白质含量的测定：
样品即所测蛋白质含量样品（含量应处理在所测范围内），依照上面操作步骤操作，测出样品的A595nm，然后利用标准曲线回归方程求出样品蛋白质含量。
一般被测样品的A595nm值在0.1—1.0之间，所以上述样品如果A595nm值太大，可以稀释后再测A595nm值，然后再计算。
(三)保存后第1天、3天、5天、7天、9天、半个月、一个月，从5个样品中取200μl用Clen-BSA专用稀释液稀释4倍，然后用考马斯亮蓝法检测蛋白含量；喷卡检测滴标准品时灵敏度和滴PBST时T、C线显色情况，滴定方法参看2.1.7，记录于表。
(四)检测内容。梯度：滴标准品滴PBST时T线颜色的深浅大小；一致性：三个平行板中T/C线颜色深浅大小一致。

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