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葛根有效成分的提取与鉴别

作品编号:SWHX0570 开发环境: WORD全文:25页 论文字数:11000
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本实验采用紫外分光光度法,以芦丁为对照品测定醇提正交试验得到的16个样品的总黄酮含量。通过测得的实验数据绘制标准曲线,进一步计算得到各个样品的总黄酮提取得率。
操作内容及步骤:
a.制备芦丁标准曲线:用电子分析天平精密称取5.0mg芦丁标准品,加甲醇溶解,并定容至100mL,即得0.050g/L的芦丁标准溶液,精密吸取芦丁标准溶液1.0、2.0、3.0、4.0、5.0mL于10mL容量瓶中,加甲醇定容至刻度,摇匀。在紫外分光光度计上,以甲醇为空白对照,选用石英比色皿在检测波长250nm下测定吸光度。以测得的吸光度值为纵坐标,标准溶液浓度为横坐标,制作标准曲线(如图1所示),得线性回归方程
此次研究主要对葛根的有效成分进行了提取与定性鉴别了葛根有效成分中葛根素的含量。采用醇提正交试验与紫外分光光度法测定总黄酮提取得率相结合的方法,得出了葛根有效成分提取的最佳醇提工艺路线。用水蒸气蒸馏法提取其中两味中药材中挥发油成分的方法合理有效,成功的提取了挥发油,并在冰箱内保存备用。对葛根有效成分的鉴别以葛根素为参考标准,在葛根素的薄层定性鉴别中,分析比较了多种展开剂的展开效果,并得出了理想的展开剂,有效的鉴别了葛根提取物中含有葛根素成分。
薄层色谱法只能作为一个定性鉴别的质量标准,其定量测定方法还有待于进一步考察摸索。葛根素的含量测定方法已见于报道的很多,如薄层扫描法、新型薄层内标法、荧光薄层扫描法和高效液相色谱法等。其中尤以高效液相色谱[16-19]使用最为广泛。
高效液相色谱具有高压(压力可达150~300 kg/cm2;色谱柱每米降压为75 kg/cm2以上)、高速(流速为0.1~10.0 mL/min)、高效(塔板数可达5000/m;在一根柱中同时分离成份可达100种)、高灵敏度(紫外检测器灵敏度可达0.01ng)的特点。使用高效液相色谱时,液体待检测物被注入色谱柱,通过压力在固定相中移动,由于被测物种不同物质与固定相的相互作用不同,不同的物质顺序离开色谱柱,通过检测器得到不同的峰信号,最后通过分析比对这些信号来判断待侧物所含有的物质。对于高沸点、热稳定性差、相对分子质量大(大于400以上)的有机物原则上都可用高效液相色谱法来进行分离、分析。
郝建莉等[16]采用HPLC外标法,测定以30%乙醇超声溶解提取葛根异黄酮胶囊的葛根素含量,固定相为Kromasil C18,流动相为甲醇-水(25:


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