1.3 实验目的
β-半乳糖苷酶基因是一个基因表达研究中的典型基因。β-半乳糖苷酶因其能催化β-半乳糖苷键水解而具有重要的工业用途，如在乳品加工中利用乳糖酶水解牛奶中乳糖生产低乳糖奶，可以有效地解决乳糖不耐症的问题，扩大牛奶的消费人群，促进乳品工业的迅速发展，增强人民身体素质。
本实验主要通过在大肠杆菌培养液中添加IPTG，去诱导表达β-半乳糖苷酶，并测试其酶的活性并估算诱导的效果。
（1） 在150ml培养基中接种大肠杆菌。
（2） 锥形瓶放在摇床上，保持在37℃，每15分钟从锥型瓶中取样品，如果OD670＞0.4，读取稀释样品的OD读数。当OD达到0.5，取2×1ml样品分为两个小试管中，然后添加1.5ml 100mM IPTQ到锥型瓶中。
（3） 取出2×1ml样品分成两个小试管后，每30秒分别加入IPTQ，直到10分钟。取0.5，1，1.5，2，2.5，3，3.5，4，4.5，5，5.5，6，6.5，7，7.5，8，8.5，9，9.5，10，20，30，40，50，60，75和90的样本。添加样本标签，加入0.5ml pH为7，含有1mg/ml氯霉素的钠磷酸盐缓冲液，混合。样品放在冰上保存。
（4） 离心，去除上清液。往沉淀物中加入0.5ml pH为7，含有1mg/ml氯霉素的钠磷酸盐缓冲液。
（5） 将两管合并成一管并用0.25ml缓冲液冲洗空管，移入试管中。
（6） 稀释90分钟时的样本，以1:9，1:19，1:39，1:59，1:79，1:99，1:199，1:399，1:499，1:999去缓冲。再准备一份空白的样品。
（7） 加入50ul溶解液，每个样品摇动15秒，立即放在冰上。
（8） 加入0.2ml ONPG，在37℃下水浴，准确的测量出当黄色出现的时间。
（9） 加入0.3ml碳酸钠试剂结束实验，记录时间。
（10） 离心那些稀释倍数少于1:19的。检测每个样品的OD420。
为了检测90分钟样品稀释的效果，以稀释倍数的倒数为横坐标，OD/min为纵坐标，画图如下：

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