从4 ℃冰箱取出3 种供试细菌后,分别接种于固体琼脂培养基斜面,细菌于37 ℃下活化24 h ；然后取一定量已活化的供试菌于装有50 mL的无菌肉汤培养基的锥形瓶中,制成菌悬液，于37 ℃下培养24 h 。用无菌的移液管取1.0 mL培养好的菌悬液于试管中,加入9.0 mL的无菌生理盐水, 得到稀释10 倍的菌悬液, 依次进行梯度稀释。将不同稀释度的菌悬液各吸取0.20 mL 分别加入到已灭菌冷却的各自适宜的平板培养基表面, 涂布均匀。按上述条件培养, 根据观察结果, 选取各自适宜的菌液浓度, 要求在该浓度下, 菌能长满整个培养皿且分布均匀；从而制得所需的大肠杆菌、枯草芽抱杆菌、金黄色葡萄球菌三种菌悬液。
以七叶苷为标准品进行测定；其中样品处理为：准确称取竹叶黄酮试样50.0 mg,加入150 mL 40°C的30%乙醇溶液中，超声波助溶，在旋转蒸发仪上减压浓缩至约100 mL体积 (除去大部分乙醇)；加入25% 的醋酸铅水溶液10 mL（醋酸铅沉淀去除黄酮等酚类物质），充分混匀后静止沉淀1 h，3000rpm 离心10 min，取上清液入分液漏斗；用水饱和的正丁醇以分别以1:1、0.5:1和0.5:1的体积比萃取三次，每次震荡0.5 h，合并正丁醇相;用去离子蒸馏水水反复洗涤正丁醇相, 直至水洗液用5%的FeCl3水溶液检验无酚性反应为止；减压浓缩回收正丁醇至干，残余物用45%甲醇溶解定容至50 mL，待用。 
酚酸的测定参考庄向平等方法[20-22]。
以对羟基苯甲酸为标准品，福林试剂还原比色法测定得试样的总酚含量，然后用差量法减去总黄酮含量，即得酚酸含量
并注明：1—1:8醇提后石油醚萃取；2—正丁醇萃取层；3—1:8醇提后石油醚萃取后正丁醇萃取水层；4—料液1:8醇提；5—料液1: 10醇提；6—料液1:6超声；7—料液1:8超声；8—料液1:10超声； 9—PH=4料液比1:8醇提；10—竹叶提取物20mpa1.5h超临界；11—超临界竹叶提取物15mpa0.5h；12—超临界25mpa竹叶提取物0.5h；13—竹叶提取物醇沉多糖； 14—料液1:8醇提，60%醇提乙酸乙酯萃取酯层； 15—料液1:8醇提，60%醇提乙酸乙酯萃取水层；
从表2 得出3 号工艺提取样品对金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌抑菌效果最好，其涂抹试验中菌落总数分别为3和4 个；菌落总数计数法与前面的抑菌圈试验结果对比性较好；同时也再次证实，所有提取液对大肠杆菌抑菌效果不明显。
试验中所用竹叶提取物的浓度为8‰，所采用菌悬液浓度为10-3 梯度。


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